Riscos Reprodutivos - Dados Experimentais

Sexta-feira, Março 25 2011 04: 03

Riscos Reprodutivos - Dados Experimentais

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O objetivo dos estudos experimentais descritos aqui, usando modelos animais, é, em parte, responder à questão de saber se as exposições a campos magnéticos de frequência extremamente baixa (ELF) em níveis semelhantes aos das estações de trabalho VDU podem afetar as funções reprodutivas em animais de uma forma que pode ser equiparada a um risco para a saúde humana.

Os estudos aqui considerados limitam-se a in vivo estudos (realizados em animais vivos) de reprodução em mamíferos expostos a campos magnéticos de frequência muito baixa (VLF) com frequências apropriadas, excluindo, portanto, estudos sobre os efeitos biológicos em geral dos campos magnéticos VLF ou ELF. Esses estudos em animais experimentais falham em demonstrar inequivocamente que os campos magnéticos, como os encontrados ao redor dos VDUs, afetam a reprodução. Além disso, como pode ser visto considerando os estudos experimentais descritos com algum detalhe abaixo, os dados em animais não lançam uma luz clara sobre os possíveis mecanismos dos efeitos reprodutivos humanos do uso de VDU. Esses dados complementam a relativa ausência de indicações de um efeito mensurável do uso de VDU em resultados reprodutivos de estudos de população humana.

Estudos de Efeitos Reprodutivos de Campos Magnéticos VLF em Roedores

Os campos magnéticos VLF semelhantes aos dos VDUs foram usados em cinco estudos teratológicos, três com camundongos e dois com ratos. Os resultados desses estudos estão resumidos na tabela 1. Apenas um estudo (Tribukait e Cekan 1987) encontrou um aumento no número de fetos com malformações externas. Stuchly et ai. (1988) e Huuskonen, Juutilainen e Komulainen (1993) relataram um aumento significativo no número de fetos com anormalidades esqueléticas, mas apenas quando a análise foi baseada no feto como uma unidade. O estudo de Wiley e Corey (1992) não demonstrou nenhum efeito da exposição a campos magnéticos na reabsorção placentária ou em outros resultados da gravidez. As reabsorções placentárias correspondem aproximadamente a abortos espontâneos em humanos. Finalmente, Frölén e Svedenstål (1993) realizaram uma série de cinco experimentos. Em cada experimento, a exposição ocorreu em um dia diferente. Entre os primeiros quatro subgrupos experimentais (dia 1 a dia 5), houve aumentos significativos no número de reabsorções placentárias entre as mulheres expostas. Nenhum desses efeitos foi observado no experimento em que a exposição começou no dia 7 e que é ilustrado na figura 1.

Tabela 1. Estudos teratológicos com ratos ou camundongos expostos a campos magnéticos formados por dentes de serra de 18-20 kHz

		Exposição de campo magnético
Estudo	Assunto¹	Frequência	Amplitude²	de duração³	Resultados ⁴
Tribukait e Cekan (1987)	76 ninhadas de ratos (C3H)	KHz 20	1 μT, 15 μT	Expostos ao 14º dia de gravidez	Aumento significativo da malformação externa; somente se o feto for usado como unidade de observação; e apenas na primeira metade do experimento; nenhuma diferença quanto à reabsorção ou morte fetal.
Stuchly et ai. (1988)	20 ninhadas de ratos (SD)	KHz 18	5.7μT, 23μT, 66μT	Exposto por toda parte gravidez e gestação	Aumento significativo de malformações esqueléticas menores; somente se o feto for usado como unidade de observação; alguma diminuição nas concentrações de células sanguíneas sem diferença quanto à reabsorção, nem quanto a outros tipos de malformações
Wiley e Corey (1992)	144 litros de camundongos (CD-1)	KHz 20	3.6 μT, 17 μT, 200 μT	Exposto por toda parte gravidez e gestação	Nenhuma diferença quanto a qualquer resultado observado (malformação, reabsorção, etc.).
Frölen e Svedenstål (1993)	No total 707 ninhadas de ratos (CBA/S)	KHz 20	15 μT	Começando em vários dias de gravidez em subexperimentos diferentes	Aumento significativo da reabsorção; somente se a exposição começar no dia 1 ao dia 5; nenhuma diferença quanto a malformações
Huuskonen, Juutilainen e Komulainen (1993)	72 ninhadas de ratos (Wistar)	KHz 20	15 μT	Expostos ao 12º dia de gravidez	Aumento significativo de malformações esqueléticas menores; somente se o feto for usado como unidade de observação; nenhuma diferença quanto a reabsorção, nem quanto a outros tipos de malformações.

¹ Número total de ninhadas na categoria de exposição máxima.

² Amplitude pico a pico.

³ A exposição variou de 7 a 24 horas/dia em diferentes experimentos.

⁴ "Diferença" refere-se a comparações estatísticas entre animais expostos e não expostos, "aumento" refere-se a uma comparação do grupo mais exposto versus o grupo não exposto.

Figura 1. A porcentagem de camundongos fêmeas com reabsorções placentárias em relação à exposição

As interpretações dadas pelos pesquisadores às suas descobertas incluem o seguinte. Stuchly e colaboradores relataram que as anormalidades observadas não eram incomuns e atribuíram o resultado a “ruído comum que aparece em todas as avaliações teratológicas”. Huuskonen et al., cujos resultados foram semelhantes aos de Stuchly et al., foram menos negativos em sua avaliação e consideraram seu resultado mais indicativo de um efeito real, mas também observaram em seu relatório que as anormalidades eram “sutis e provavelmente não prejudicar o desenvolvimento posterior dos fetos”. Ao discutir suas descobertas em que os efeitos foram observados nas primeiras exposições, mas não nas posteriores, Frölén e Svedenstål sugerem que os efeitos observados podem estar relacionados a efeitos iniciais na reprodução, antes que o óvulo fertilizado seja implantado no útero.

Além dos resultados reprodutivos, uma diminuição nos glóbulos brancos e vermelhos foi observada no grupo de maior exposição no estudo de Stuchly e colaboradores. (As contagens de células sanguíneas não foram analisadas nos outros estudos.) Os autores, embora sugerissem que isso poderia indicar um efeito moderado dos campos, também observaram que as variações nas contagens de células sanguíneas estavam “dentro da faixa normal”. A ausência de dados histológicos e a ausência de quaisquer efeitos nas células da medula óssea dificultaram a avaliação desses últimos achados.

Interpretação e comparação de estudos

Poucos dos resultados descritos aqui são consistentes entre si. Conforme afirmado por Frölén e Svedenstål, “conclusões qualitativas com relação aos efeitos correspondentes em seres humanos e animais de teste não podem ser tiradas”. Examinemos alguns dos raciocínios que poderiam levar a tal conclusão.

As descobertas do Tribukait geralmente não são consideradas conclusivas por dois motivos. Primeiro, o experimento só produziu efeitos positivos quando o feto foi usado como unidade de observação para análise estatística, enquanto os próprios dados realmente indicavam um efeito específico da ninhada. Em segundo lugar, há uma discrepância no estudo entre os resultados da primeira e da segunda parte, o que implica que os resultados positivos podem ser o resultado de variações aleatórias e/ou fatores não controlados no experimento.

Estudos epidemiológicos que investigam malformações específicas não observaram aumento de malformações esqueléticas entre crianças nascidas de mães que trabalham com VDUs e, portanto, expostas a campos magnéticos VLF. Por essas razões (análise estatística baseada no feto, anormalidades provavelmente não relacionadas à saúde e falta de concordância com achados epidemiológicos), os resultados – sobre malformações esqueléticas menores – não são de molde a fornecer uma indicação firme de risco à saúde humana.

Antecedentes Técnicos

Unidades de observação

Ao avaliar estatisticamente estudos em mamíferos, deve-se levar em consideração pelo menos um aspecto do mecanismo (muitas vezes desconhecido). Se a exposição afetar a mãe – que por sua vez afeta os fetos da ninhada, é o estado da ninhada como um todo que deve ser usado como unidade de observação (o efeito que está sendo observado e medido), pois o indivíduo resultados entre irmãos de ninhada não são independentes. Se, por outro lado, for levantada a hipótese de que a exposição age direta e independentemente sobre os fetos individuais dentro da ninhada, então pode-se usar apropriadamente o feto como uma unidade para avaliação estatística. A prática usual é contar a ninhada como a unidade de observação, a menos que haja evidência disponível de que o efeito da exposição em um feto seja independente do efeito nos outros fetos da ninhada.

Wiley e Corey (1992) não observaram um efeito de reabsorção placentária semelhante ao observado por Frölén e Svedenstål. Uma razão apresentada para essa discrepância é que diferentes cepas de camundongos foram usadas, e o efeito pode ser específico para a cepa usada por Frölén e Svedenstål. Além desse efeito de espécie especulado, também é digno de nota que tanto as fêmeas expostas a campos de 17 μT quanto os controles no estudo de Wiley tiveram frequências de reabsorção semelhantes às das fêmeas expostas na série Frölén correspondente, enquanto a maioria dos grupos não expostos no estudo Frölén estudo teve frequências muito mais baixas (ver figura 1). Uma explicação hipotética poderia ser que um maior nível de estresse entre os camundongos do estudo de Wiley resultou do manuseio dos animais durante o período de três horas sem exposição. Se for esse o caso, um efeito do campo magnético poderia talvez ter sido “afogado” por um efeito de estresse. Embora seja difícil descartar definitivamente tal teoria a partir dos dados fornecidos, ela parece um tanto exagerada. Além disso, seria esperado que um efeito “real” atribuível ao campo magnético fosse observável acima de um efeito de estresse constante à medida que a exposição ao campo magnético aumentasse. Essa tendência não foi observada nos dados do estudo de Wiley.

O estudo de Wiley relata o monitoramento ambiental e a rotação de gaiolas para eliminar os efeitos de fatores descontrolados que podem variar dentro do próprio ambiente da sala, como podem os campos magnéticos, enquanto o estudo de Frölén não. Assim, o controle de “outros fatores” é pelo menos mais bem documentado no estudo de Wiley. Hipoteticamente, fatores não controlados que não foram randomizados poderiam oferecer algumas explicações. Também é interessante notar que a falta de efeito observada na série do dia 7 do estudo de Frölén parece ser devida não a uma diminuição nos grupos expostos, mas a um aumento no grupo controle. Assim, as variações no grupo de controle provavelmente são importantes a serem consideradas ao comparar os resultados díspares dos dois estudos.

Estudos de Efeitos Reprodutivos de Campos Magnéticos ELF em Roedores

Vários estudos foram realizados, principalmente em roedores, com campos de 50 a 80 Hz. Detalhes sobre seis desses estudos são mostrados na tabela 2. Embora outros estudos de ELF tenham sido realizados, seus resultados não apareceram na literatura científica publicada e geralmente estão disponíveis apenas como resumos de conferências. Em geral, os resultados são de “efeitos aleatórios”, “nenhuma diferença observada” e assim por diante. Um estudo, no entanto, encontrou um número reduzido de anormalidades externas em camundongos CD-1 expostos a um campo de 20 mT e 50 Hz, mas os autores sugeriram que isso pode refletir um problema de seleção. Alguns estudos foram relatados em outras espécies além de roedores (macacos rhesus e vacas), novamente aparentemente sem observações de efeitos adversos da exposição.

Tabela 2. Estudos teratológicos com ratos ou camundongos expostos a campos magnéticos senoidais ou de pulso quadrado de 15-60 Hz

		Exposição de campo magnético
Estudo	Assunto¹	Frequência	Amplitude	Descrição	Duração da exposição	Resultados
Rivas e Rius (1985)	25 ratos suíços	50 Hz	83 μT, 2.3 mT	Pulsado, duração de pulso de 5 ms	Antes e durante a gravidez e crescimento da prole; total de 120 dias	Sem diferenças significativas ao nascer em qualquer parâmetro medido; diminuição do peso corporal masculino quando adulto
Zeca et ai. (1985)	10 ratos SD	50 Hz	5.8 mT		Dia 6-15 da gravidez, 3h/dia	Sem diferenças significativas
Tribukait e Cekan (1987)	35 camundongos C3H	50 Hz	1 μT, 15 μT (pico)	Formas de onda quadradas, duração de 0.5 ms	Dia 0-14 da gravidez, 24h/dia	Sem diferenças significativas
Salzinger e Freimark (1990)	41 descendentes de ratos SD. Apenas filhotes machos usados	60 Hz	100 μT (rms). Também elétrico exposição de campo.	Circular uniforme polarizada	Dia 0-22 de gravidez e 8 dias após o nascimento, 20 h/dia	Menor aumento na resposta do operando durante o treinamento a partir dos 90 dias de idade
McGivern e Sokol (1990)	11 filhos de ratos SD. Apenas filhotes machos usados.	15 Hz	800 μT (pico)	Formas de onda quadradas, duração de 0.3 ms	Dia 15-20 da gravidez, 2x15 min/dia	Comportamento de marcação de cheiro territorial reduzido aos 120 dias de idade. O peso de alguns órgãos aumentou.
Huuskonen et ai. (1993)	72 ratos Wistar	50 Hz	12.6μT (rms)	Senoidal	Dia 0-12 da gravidez, 24h/dia	Mais fetos/ninhada. Malformações esqueléticas menores

¹ Número de animais (mães) na categoria de exposição mais alta, salvo indicação em contrário.

Como pode ser visto na tabela 2, uma ampla gama de resultados foi obtida. Esses estudos são mais difíceis de resumir porque há muitas variações nos regimes de exposição, nos desfechos em estudo e em outros fatores. O feto (ou o filhote sobrevivente, “selecionado”) foi a unidade utilizada na maioria dos estudos. No geral, está claro que esses estudos não mostram nenhum efeito teratogênico grave da exposição a campos magnéticos durante a gravidez. Conforme observado acima, “pequenas anomalias esqueléticas” não parecem ser importantes ao avaliar os riscos humanos. Os resultados dos estudos comportamentais de Salzinger e Freimark (1990) e McGivern e Sokol (1990) são intrigantes, mas não constituem uma base para indicações de riscos à saúde humana em uma estação de trabalho VDU, seja do ponto de vista dos procedimentos (uso do feto , e, para McGivern, uma frequência diferente) ou de efeitos.

Resumo de estudos específicos

Retardo comportamental 3-4 meses após o nascimento foi observado na prole de fêmeas expostas por Salzinger e McGivern. Esses estudos parecem ter usado descendentes individuais como unidade estatística, o que pode ser questionável se o efeito estipulado for devido a um efeito sobre a mãe. O estudo de Salzinger também expôs os filhotes durante os primeiros 8 dias após o nascimento, de modo que este estudo envolveu mais do que riscos reprodutivos. Um número limitado de ninhadas foi usado em ambos os estudos. Além disso, esses estudos não podem ser considerados como confirmando os achados um do outro, pois as exposições variaram muito entre eles, como pode ser visto na tabela 2.

Além de uma mudança comportamental nos animais expostos, o estudo de McGivern observou um aumento de peso de alguns órgãos sexuais masculinos: a próstata, as vesículas seminais e o epidídimo (todas as partes do sistema reprodutor masculino). Os autores especulam se isso poderia estar ligado à estimulação de alguns níveis enzimáticos na próstata, uma vez que os efeitos do campo magnético em algumas enzimas presentes na próstata foram observados para 60 Hz.

Huuskonen e colaboradores (1993) observaram um aumento no número de fetos por ninhada (10.4 fetos/ninhada no grupo exposto a 50 Hz vs. 9 fetos/ninhada no grupo controle). Os autores, que não observaram tendências semelhantes em outros estudos, minimizaram a importância dessa descoberta, observando que “pode ser incidental e não um efeito real do campo magnético”. Em 1985, Rivas e Rius relataram um achado diferente com um número ligeiramente menor de nascidos vivos por ninhada entre grupos expostos versus não expostos. A diferença não foi estatisticamente significativa. Eles realizaram os outros aspectos de suas análises tanto “por feto” quanto “por ninhada”. O aumento observado em malformações esqueléticas menores só foi visto com a análise usando o feto como unidade de observação.

Recomendações e resumo

Apesar da relativa falta de dados positivos e consistentes que demonstrem os efeitos reprodutivos humanos ou animais, ainda são necessárias tentativas de replicação dos resultados de alguns estudos. Esses estudos devem tentar reduzir as variações nas exposições, métodos de análise e cepas de animais utilizados.

Em geral, os estudos experimentais realizados com campos magnéticos de 20 kHz têm fornecido resultados bastante variados. Aderindo estritamente ao procedimento de análise da ninhada e teste de hipótese estatística, nenhum efeito foi mostrado em ratos (embora achados não significativos semelhantes tenham sido feitos em ambos os estudos). Em camundongos, os resultados foram variados e nenhuma interpretação única e coerente deles parece possível no momento. Para campos magnéticos de 50 Hz, a situação é um pouco diferente. Estudos epidemiológicos relevantes para essa frequência são escassos, e um estudo indicou um possível risco de aborto espontâneo. Por outro lado, os estudos experimentais com animais não produziram resultados semelhantes. No geral, os resultados não estabelecem um efeito dos campos magnéticos de frequência extremamente baixa dos VDUs no resultado da gravidez. A totalidade dos resultados falha, portanto, em sugerir um efeito dos campos magnéticos VLF ou ELF dos VDUs na reprodução.

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